鸡杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒

鸡性/通透性蛋白(BPI)ELISA试剂盒

竞争ELISA：此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射测定。其基本程序为：① 包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定，如果待检溶液中抗原越多，被结合的标记抗原的量就越少，有色产物就，这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测；其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记，而且因为抗原的结构不同，还需应用不同的结合。此外，试验中应用酶标抗原的量较多。

标记：良好的酶结合物取决于两个条件：即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要，因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中，的活性有所，故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的，可性，而且可稀释使用，非特吸附。

自备材料

1）蒸馏水。

2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3）振荡器及磁力搅拌器等。



鸡性/通透性蛋白(BPI)ELISA试剂盒

样品收集、处理及保存

1）-----操作中避免任何细胞。使用不含热原和内的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将和红细胞迅速小心地分离。

2）-----EDTA、柠檬酸盐、肝素可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒性能

1. 灵敏度的检测浓度小于1号品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果判断与分析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测含量可根据其OD值由曲线换算出相应的浓度。

免责声明

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。

严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

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